Hibridación somática de cítricos ácidos para incorporar resistencia a factores bióticos

Abstract

RESUMEN El limón mexicano [Citrus aurantifolia (Christm) Swingle] es altamente sensible al virus de la tristeza de los cítricos VTC. El desarrollo de variedades resistentes es la mejor opción para el control de la enfermedad. Algunas especies de cítricos pueden ser relativamente tolerante a este virus. La hibridación somática vía la fusión de protoplastos es una alternativa viable para incorporar genes que confieran algún grado de tolerancia. Para la hibridación somática es necesario contar con callo embriogénico de alguno de los progenitores. En este trabajo se evaluó el potencial para desarrollar callo embriogénico de óvulos no desarrollados de limón mexicano y tres variedades de limón verdadero (C. limón Burm.), cultivados en medio MT con sacarosa (EME+S), MT con 5ml/l de Cinetina (DOG), y MT con 0.775 g/l de L-glutamina (H+H), todos adicionados con 500 mg/l de extracto de malta. La producción de callo embriogénico también se estudió en tejido de estilo estigma de limón mexicano cultivado en medio MS adicionado con 500 mg/l de extracto de malta y 13.3 uM de BAP. El medio DOG resulto ser el mejor para inducción de callo utilizando óvulos como explantes. La fusión de protoplastos se realizó utilizando una suspensión de callo embriogénico en medio H+H y hojas de plantas germinadas in vitro de ambos progenitores , haciendo fusiones en ambos sentido más no se lograron obtener plantas híbridas somáticas.

ABSTRACT The Mexican lime [Citrus aurantifolia (Christm) Swingle] is highly sensitive to the citric tristeza virus. . The improvement of resistant varieties is the best option to for disease control the disease. Some citric varieties could be relatively tolerant to this virus. The somatic hybridization via protoplast fusion is viable to incorporate genes that confer some grade of tolerance. For somatic hybridization is necessary to have embryogenic callus from one of the parents. In this work we evaluated the potential to develop embryogenic callus from ovules from Mexican lime and three varieties of true lime (C. Limon Burm.), Cultivate in MT media with sucrose (EME+S), MT with 5 ml/ l kinetin (DOG), and MT media with 0.775 g/l L-glutamine (H +H), all with 500 mg/l of malt extract. We studied the production of emryogenic callus from style and stigma tissue too from Mexican Lime cultivated in MS media added with 500 mg/l of malt extract and 13.3 uM BAP. The DOG media was the best media for callus induction in ovules tissue like explants. The protoplast fusion were using an embryogenic callus suspension in H+H media and leaves from in vitro plants from both parents, making fusions in both senses, but we cannot obtain somatic hybrid plants.