Transformación genética de neochloris oleoabundans utilizando agrobacterium tumefaciens y electroporación

Abstract

Se evaluó las diferentes formas de transformación genética por medio de electroporación y Agrobacterium tumefaciens de la microalga Neochloris oleoabundans. Se obtuvieron diferentes resultados de transformación según el método utilizado, así como un mejor índice de colonias trasformadas en un método. En cuanto al resultado de la transformación, se utilizó zeocina como agente seleccionador y el gen de GFP como respuesta a esta. Se obtuvo un grado de transformación de 3.33% utilizando Agrobacterium tumefaciens y 1.33% en caso de electroporación, esto ya que el plásmido utilizado pPha-DUAL-[2xNR], no fue compatible con la microalga. Los medios de cultivo para que creciera la microalga presuntamente trasformada fueron los medios BBM, los cuales tienen los nutrientes necesarios de crecimiento, así como concentraciones de Zeocina entre 50 μg/mL a 200 μg/mL, para ver como reaccionaba la microalga con los diferentes métodos de transformación. De igual manera se utilizó un espectro de luz de 305 nm para que en gen de GFP reaccionara y mostrara su luminiscencia.

Different forms of genetic transformation were evaluated by electroporation and Agrobacterium tumefaciens of the microalgae Neochloris oleoabundans. Different processing results were obtained by the method used and a better index of colonies transformed in a method. In the result of the transformation, zeocin was used as selecting agent and the GFP gene in response to this. A 3.33% degree of transformation using Agrobacterium tumefaciens and 1.33% for electroporation were obtained, as result of the plasmid used pPha-DUAL- [2xNR] was not compatible with the microalgae. The culture media to grow microalgae were allegedly transformed by BBM media, which have the necessary nutrients for growth and Zeocin concentrations of 50 mg / mL to 200 mg / mL, to see how they react to different microalgae transformation methods. In the same way a spectrum of light of 305 nm was used to react in GFP gene and show its luminescence.