Evaluación del efecto de un agonista de la GnRH en un modelo de parálisis cerebral en ratas neonatas

Abstract

Resumen La hipoxia-isquemia cerebral perinatal (HICP) tiene una incidencia de 1 a 3 casos por cada 1000 niños nacidos vivos y es una de las principales causas de parálisis cerebral (PC) por ello se requieren terapias innovadoras. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del AL en un modelo de PC con ratas neonatas sometidas a HICP. Para ello se utilizaron 78 ratas Wistar de ambos sexos de 7 días las cuales se dividieron en 3 grupos: sham, HICP + solución salina (SS) e HICP + AL (AL). A los grupos de SS y AL se les realizó la lesión HICP siguiendo la técnica de Rice & Vanucci y posteriormente se inició el tratamiento (10μg/kg IM) 3 días consecutivos y después cada cuarto día durante 5 semanas. Se evaluó la función motora (pruebas de reflejos neonatales, campo abierto y rota rod), la función cognitiva (prueba de reconocimiento de objeto novedoso, reconocimiento de lugar y laberinto en Y), la inflamación (expresión de IL-1β y TN F-α mediante RT-qPCR y la relación p-IκBα/IκBα mediante western blot), el efecto neurotrófico (expresión de las proteínas NF-200, espinofilina, MAP-2 y MBP por western blot) y el daño histológico mediante el conteo de neuronas en el giro dentado del hipocampo. En comparación con el grupo sham, las ratas tratadas con SS tuvieron un incremento en la expresión de las citocinas proinflamatorias IL-1β y TNF-α y la conducta ansiosa, mientras que el grupo de AL tuvo una expresión similar a sham excepto en la prueba de memoria espacial. En conclusión, el AL tiene un papel inmunomodulador si es administrado en las primeras horas después de la lesión y previene la conducta ansiolítica en un modelo de HICP en ratas, aún hace falta realizar más estudios para esclarecer la seguridad de su uso en la etapa neonatal. Palabras clave: Acetato de leuprolida, hipoxia-isquemia cerebral perinatal, hormona liberadora de gonadotropinas, inmunomodulación, parálisis cerebral.

Abstract Perinatal hypoxia-ischemia brain injury (PHIBI) has an incidence of 1 to 3 cases per 1,000 live births and is one of the main causes of cerebral palsy (CP), which is why innovative therapies are required. The objective of this study was to evaluate the effect of leuprolide acetate (LA) in a CP model with neonatal rats subjected to PHIBI. For this, 78 7-day-old Wistar rats of both sexes were used, which were divided into 3 groups: sham, PHIBI + saline solution (SS) and PHIBI + AL (AL). The SS and AL groups underwent the PHIBI lesion following the Rice & Vanucci technique and subsequently started treatment (10μg/kg IM) on 3 consecutive days and then every fourth day for 5 weeks. We evaluated motor function (neonatal reflex tests, open field, and rota rod), cognitive function (novel object recognition test, place recognition, and Ymaze), inflammation (IL-1β and TN F-α expression by RT-qPCR and the p-IκBα/IκBα ratio by w), the neurotrophic effect (expression of NF-200, spinophylline, MAP-2 and MBP proteins by WB) and histological damage by counting neurons in the dentate gyrus of the hippocampus. Compared with the sham group, SS-treated rats had increased expression of the proinflammatory cytokines IL-1β, TNF-α and anxious behavior, while the AL group had expression like sham except for the test of spatial memory. In conclusion, LA has an immunomodulatory role if it is administered in the first hours after the injury and prevents anxiolytic behavior in a rat model of PHIBI. More studies are still needed to clarify the safety of its use in the neonatal stage. Key words: Cerebral palsy, gonadotropin-releasing hormone, immunomodulation, leuprolide acetate, perinatal hypoxia-ischemia brain injury.