Análisis inmunohistoquímico comparativo de la expresión y distribución de la amelogenina y enamelisina en el desarrollo del órgano del esmalte en dientes fetales humanos

Abstract

RESUMEN La amelogenina y la enamelisina, son proteínas que desempeñan un papel fundamental en la formación y desarrollo del esmalte dental. La amelogenina durante del desarrollo del germen dental compone el 90% de la matriz orgánica del esmalte y constituye un andamio para la organización de los cristales de hidroxiapatita. Mientras que la enamelisina, a medida que el esmalte madura, es secretada para degradar a la amelogenina, de tal manera que el espacio dejado por esa proteína sea ocupado por los prismas del esmalte. Estas proteínas son sintetizadas intracelularmente en el Retículo Edoplásmico Rugoso (RER), mientras que el Aparato de Golgi es el organelo que realiza las modificaciones postraduccionales, la distribución y secreción de las mismas. La alteración en el proceso de secreción de estas proteínas, produce graves consecuencias en la estructura del órgano dentario maduro, tal y como se manifiesta en la amelogénesis imperfecta. Un aspecto que aun no se ha dilucidado concretamente, son las vías intracelulares de expresión y distribución espacial de amelogenina y enamelisina, durante el desarrollo del germen dental humano. Por lo que en la presente tesis se realizó un estudio de los sitios de expresión y la distribución espacial extracelular e intracelular de la amelogenina y enamelisina, así como vías de secreción en maxilares fetales humanos. En nuestro estudio realizamos un marcaje fluorescente entre Retículo endoplásmico y enamelisina en el cual se percibe que como ambos comparten sitios de expresión y localización espacial. Analizando por medio de colocalización, se aprecia que el porcentaje de esta es de un 99.95%, lo que es altamente probable que la secreción de la enamelisina se da por intermedio de retículo endoplásmico. Así mismo se realizó marcaje fluorescente entre Aparato de Golgi y enamelisina dándonos una colocalización de un 99.92% lo que nos indica que es probable un acoplamiento de estas dos estructuras en el proceso de secreción de la proteína, indicándonos cual es su vía de secreción. Al analizar la colocalización de ambas proteínas vemos la colocalización de amelogenina y enamelisina en estadio presecretor observamos una mayor presencia de amelogenina que de enamelisina siendo la localización más específica en el citosol. En una acercamiento podremos observar que se presentan en este estadio la secreción de amelogenina por medio de vesículas en el órgano del esmalte, no sucediendo lo mismo con la enamelisina la cual se percibe dentro de la célula creyendo que está en estado latente. El análisis de colocalización de ambas proteínas nos marca un 90.81%. En el análisis en estadio secretor encontramos que existe secreción de ambas proteínas observando presencia de ambas en el esmalte mineralizado recién formado, su porcentaje de colocalización de estas proteínas bajó siendo de un 78.65% lo que nos permitiría sugerir que esto se da por el aumento de secreción de enamelisina en este estadio y la degradación que está sufriendo la amelogenina por esta.