Evaluación del efecto inmunomodulador del glicomacropéptido bovino (GMPb) en la hipersensibilidad mediada por mastocitos

Abstract

RESUMEN Los padecimientos alérgicos son reacciones de hipersensibilidad dependientes de mastocitos, caracterizados por la participación de inmunoglobulinas (Ig) E alérgeno específicas y linfocitos T cooperadores tipo 2. La búsqueda de nuevas terapias para las enfermedades alérgicas, ha sido primordial en los últimos años. El glicomacropéptido bovino (GMPb) es un componente de la leche biológicamente activo que presenta algunas funciones inmunomoduladoras. Nosotros examinamos si la administración oral del GMPb afecta el desarrollo de la sensibilización alérgica y la severidad de las reacciones de hipersensibilidad cutánea inmediata así como de anafilaxia sistémica en un modelo in vivo. Por otro lado evaluamos si el GMPb ejerce alguna acción directa sobre el mastocito un modelo in vitro. Las ratas se trataron con o sin GMPb (500 mg/ kg /día) antes o después de la sensibilización con ovoalbúmina (OVA) o antes de la exposición al compuesto 48/80 (C48/80). Se evaluaron varios indicadores de alergia. Adicionalmente, mastocitos peritoneales de rata fueron estimulados con diferentes concentraciones de GMPb in vitro y se determinó su activación. El tratamiento con GMPb resultó en una reducción del 80% en el título de IgE específica después de la sensibilización con OVA. Además la administración del GMPb suprimió marcadamente la respuesta proliferativa de esplenocitos al alérgeno y la producción de interleucina (IL)-13 por esplenocitos de animales sensibilizados, pero no afectó los niveles de IL-10. Además el pre-tratamiento con GMPb atenuó la intensidad de la reacción cutánea inmediata inducida por el antígeno y protegió a las ratas sensibilizadas de un choque anafiláctico severo. Sin embargo, cuando el GMPb se administró tras la sensibilización, no modificó la intensidad de la respuesta anafiláctica cutánea desarrollada por el alérgeno. Por otro lado, la inmunomodulación del GMPb sobre la respuesta alérgica no fue directamente sobre el mastocito, ya que éste no protegió a las ratas de la reacción anafilactoide generada por el C48/80. Además el GMPb no activó la desgranulación de los mastocitos de rata ni al factor de transcripción nuclear B in vitro. Estos datos demuestran, por primera vez, que la administración del GMPb previene la sensibilización al alérgeno y reduce la severidad de la reacción de fase temprana inducida por el mismo en la hipersensibilidad cutánea y en la anafilaxia sistémica. El GMPb puede ser usado como un nuevo agente profiláctico para el control de enfermedades alérgicas

ABSTRACT Allergic disorders are hipersensitivity reactions mast cell dependent, characterized by the involvement of allergen-specific immunoglobulin (Ig)E antibodies and T helper type 2 cells. The search for new therapies for allergic diseases has been the primary focus of interest for many investigations in recent years. Bovine glycomacropeptide (GMPb) is a biologically active component of milk that exhibits a range of immunomodulatory functions. We examined whether oral administration of GMP could affect the development of allergic sensitization and the severity of immediate cutaneous hypersensitivity reactions and of anaphylaxis in a model in vivo. We also analyzed whether GMPb directly active rat mast cell in vitro. Rats were treated with or without GMP (500mg/ kg/ day) before or after sensitization with ovalbumin (OVA) or before exposition to compound 48/80 (C48/80). Several indicators of allergy were evaluated. Besides, rat peritoneal mast cells were stimulated with different concentrations of GMPb in vitro and their activation was determined. Pretreatment with GMPb resulted in reduction (80 %) of allergen-specific IgE titer in rats when sensitized with OVA. GMPb administration also markedly suppressed the proliferative response of splenocytes to allergen and the production of interleukin (IL)-13 (70 %) by splenocytes of sensitized animals, but not altered IL-10 levels. In addition, GMPb pretreatment attenuated the intensity of the immediate cutaneous reaction induced by allergen and protected the sensitized rats from severe anaphylaxis. However, when GMPb was administrated after sensitization, the intensity of the local cutaneous anaphylaxis induced by OVA was not affected. In other hands, immunomodulation by GMPb was not directly through mast cell, because GMPb does not protected rats of anaphylactoide reaction generated by compound 48/80. In addition, GMPb does not active rat mast cell degranulation or the nuclear transcription factor B, in vitro. These data demonstrate, for the first time, that the administration of GMPb prevents allergen sensitization and reduces the severity of the early-phase reaction induced by allergen in cutaneous hypersensitivity and in anaphylaxis. GMPb may be used as a novel prophylactic agent for the control of allergic diseases.