Resumen
La amibiasis es una infección entérica causada por el protozoo parásito Entamoeba
histolytica (E. histolytica). Esta enfermedad afecta a 50 millones de personas en el
mundo, causando 100,000 muertes por año. La principal característica de este parásito
es el gran poder citotóxico que le permite invadir y destruir los tejidos humanos. Con el
fin de estudiar y profundizar en el conocimiento sobre los mecanismos a través de los
cuales E. histolytica produce daño durante su proceso de invasión, en este trabajo
analizamos el papel que juegan las especies reactivas de oxígeno (ROS), los factores
de transcripción y las citocinas de la respuesta inmune innata en el proceso de invasión
en interacciones de 5, 10 y 20 h en un modelo de amibiasis intestinal en hámster.
Nuestros resultados muestran que durante la infección, los trofozoítos de E. histolytica
son capaces de estimular en las células del huésped, un aumento en los niveles
intracelulares de ROS durante el desarrollo de la infección; pudimos observar que gran
parte de las células de la mucosa intestinal fueron las que respondieron
constantemente al estrés celular. Por otro lado se observó que E. histolytica induce una
respuesta en el huésped, que incluye la expresión de citocinas proinflamatorias como
la interleucina 8 (IL-8) y dependiendo de la localización del parásito en el tejido, fueron
distintas las líneas celulares en liberar esta citocina, encontramos que en interacciones
tempranas, las células epiteliales de la mucosa intestinal son las responsables de la
liberación de IL-8, en lapsos tardíos, las células epiteliales dejan de expresar esta
citocina y su producción la llevan a cabo las células del infiltrado inflamatorio. Así
mismo pudimos observar que durante la invasión el parásito no es capaz de estimular
la activación del NF-B. Por otro lado se analizó el tipo de muerte celular inducida en la
amibiasis intestinal mediante Western blot, y se observó la presencia de caspasa 3
positiva (10 y 20 h post-infección) en células intestinales, estos datos nos sugieren que
E. histolytica induce muerte celular por apoptosis dependiente de caspasa.
En conclusión estos resultados demuestran que E. histolytica induce formación de
especies reactivas de oxigeno y citocinas pro-inflamatorias en células intestinales de
hámster, provocando muerte por apoptosis dependiente de caspasa.
Summary
Amebiasis is an infection caused by enteric protozoan parasite Entamoeba histolytica
(E. histolytica). This disease affects 50 million people worldwide, causing 100,000
deaths per year. The main characteristic of this parasite it´s great cytotoxic power by
which invades and destroy human tissues. The aim of this research was to study and
deepen knowledge about the mechanisms by means E. histolytica causes damage
during the invasion process. In this paper we analyze the role of reactive oxygen
species, transcription factors and innate immune response cytokines during the
invasion process, at interactions of 5, 10 and 20 hours in a hamster model of intestinal
amoebiasis. Our results show that during infection, the trophozoites of E. histolytica are
able to stimulate the host cells inducing an increase in intracellular levels of ROS during
the course of infection. We observed that much of the intestinal mucosal cells were
constantly responding to cellular stress. On the other hand, it was observed that E.
histolytica induces a response in the host, including the expression of proinflammatory
cytokines such as interleukin 8 (IL-8) although the cell types that release this cytokine
depend on the location of the parasite in the tissue. We found that at early interactions,
epithelial cells of the intestinal mucosa are responsible for the release of IL-8. In late
periods, the epithelial cells fail to express this cytokine, and its production was carried
by inflammatory cells. Also, the parasite is not able to activate NF-B to establish the
inflammatory process. On the other hand we analyze the type of cell death induced
during intestinal amoebiasis by Western blot, and observed the presence of intestinal
cells caspase 3 positive (10 and 20 h post-infection). These data suggest that E.
histolytica induces cell death by caspase-dependent apoptosis.
In conclusion these results show that E. histolytica induces formation of reactive oxygen
species and pro-inflammatory cytokines in hamster intestinal cells, causing death by
caspase-dependent apoptosis.
