RESUMEN
OBJETIVO. Analizar la expresión de GRP78 y ATF6, dos de los actores principales
de la respuesta a proteínas mal conformadas (RPMC) en cataratas seniles y
diabéticas.
DISEÑO. Se realizo un estudio prospectivo, experimental, descriptivo y transversal.
METODOS. Se midió la expresión cualitativa y cuantitativa de GRP78 y ATF6 in en
muestras quirúrgicas de 11 pacientes con cataratas seniles, 9 con cataratas
diabéticas y 3 cristalinos normales. Ambas proteínas fueron detectadas por técnicas
de inmunofluorescencia e inmunohistoquímica con anticuerpos de oro coloidal.
También se realizo morfometría cuantitativa para analizar las diferencias en GRP78
y ATF6 entre muestras. Se uso para el análisis estadístico la prueba de Mann-
Whitney.
RESULTADOS. Por microscopia electrónica de barrido en los cristalinos normales
encontramos la organización característica de las fibras en el cristalino, se
observaban perfectamente alineadas y con interdigitaciones. Los cristalinos de
pacientes con cataratas seniles o diabéticas mostraron fibras cristalinianas con el
mismo patrón de desalineación y desorganización entre ellas. Las proteínas
GRP78 y ATF6 se detectaron através de inmunofluorescencia en los cristalinoscon
cataratas seniles y diabéticas, pero No en los cristalinos normales. Al usar la
técnica de inmuno-oro con el microscopio electrónico de transmisión encontramos
que en los tejidos con cataratas diabéticas, los gránulos de oro coloidal en GRP78 y
ATF6 eran 30 y 35% más, comparado con los de las cataratas seniles (p<0.05).
CONCLUSIONES. Nuestros resultados mostraron por primera vez, que GRP78 y
ATF6 están presentes en los cristalinos con cataratas seniles y diabéticas,
estableciendo que la respuesta a proteínas mal conformadas puede ser importante
en el proceso de caratogenesis.
ABSTRACT
PURPOSE. To analyze the expression of GRP78 and ATF6, two actors of the
unfolded protein response (UPR) in age related and diabetes associated cataracts.
DESIGN. We performed a prospective, experimental, descriptive and transversal
trial.
METHODS. We measured the qualitative and quantitative expression of GRP78 and
ATF6 in surgical samples, from 11 senile, 9 diabetic cataracts and three normal
leses. Both proteins were detected by immunofluorescence and immunogold
conjugated antibodies. Quantitative morphometry was used to analyze differences
in GRP78 an ATF6 between samples. Mann-Whitney test was used for statistical
analysis.
RESULTS. Through scanning electron microscopy we found the characteristic
organization of fibers in normal lenses, with regular alignment and interdigitation
between them. On other hand, lenses of patients with either senile or diabetic
cataracts showed the same pattern of misalignment and disorganization of the
fibers. Both proteins were detected through immunofluorescence in senile and
diabetic cataracts, but not normal lenses. Using immunogold conjugated antibodies
and transmission electron microscopy, on diabetic cataracts, GRP78 and ATF6
grains were 30 and 35% higher, compared to senile (p<0.05).
CONCLUSIONS. Our data show for the first time in humans, that GRP78 and ATF6
are present in lens fibers of senile and diabetic cataracts, establishing that the
unfolded protein response may be important in the process of cataractogenesis.
