RESUMEN Pereskia sacharosa Griseb. es una planta que se emplea en la medicina tradicional como analgésico y para trastornos de la piel. Actualmente, se buscan tratamientos ante enfermedades neurodegenerativas, donde está involucrada una respuesta inflamatoria crónica. En este trabajo se evaluó la actividad antiinflamatoria de P. sacharosa en modelos animales sometidos a neuroinflamación con lipopolisacárido y se identificaron compuestos en la planta y cultivos in vitro de tejido calloso, como alternativa al uso de ejemplares del ambiente. A partir de plantas cultivadas in vitro, se indujo tejido calloso con ácido naftalenacético y tidiazurón. Se obtuvo el extracto etanólico de hojas de P. sacharosa y se separaron los compuestos mediante cromatografía en columna abierta, y sus fracciones, así como el extracto etanólico de callo, se analizaron mediante cromatografía en capa fina para identificar grupos de compuestos. Por otro lado, ratones CD1 y C57BL/6JN se administraron con la fracción 10 y su presencia en cortes cerebrales se analizó por microscopía de fluorescencia; mientras que cortes de ratones con LPS o F10+LPS, se sometieron a hibridación in situ para detectar ARNm de cFos, marcador de actividad neural, y CD14, receptor del LPS. Finalmente, ratas Wistar con LPS o F10+LPS se sometieron a electroencefalografía del hipocampo. Como resultados, se estableció un cultivo de callos y el análisis cromatográfico reveló flavonoides, terpenos y esteroles. En ratones, F10 atravesó la barrera hematoencefálica y redujo la expresión de cFos y CD14 en el hipotálamo a las 3 h. Además, la actividad eléctrica del hipocampo en ratas con LPS mostró disminución de ondas theta, mientras que con F10 se mantuvo esta actividad, relacionada con movimiento y relajación. Estos hallazgos indican que los compuestos de P. sacharosa disminuyen los signos de inflamación, permitiendo el regreso temprano de la actividad ambulatoria del animal aún con la enfermedad activa.
Palabras clave: neuroinflamación, tejido calloso, fitoquímica, electroencefalografía, cFos, CD14.
ABSTRACT
Pereskia sacharosa Griseb. is a plant used in traditional medicine as an analgesic and for skin disorders. Currently, treatments are requested for neurodegenerative diseases where a chronic inflammatory response is involved. In this work, antiinflammatory activity of P. sacharosa was evaluated in animal models exposed to neuroinflammation with lipopolysaccharide, and compounds were identified in the plant and callus tissue cultures as an alternative of the use of environmental specimens. Callous tissue was induced from in vitro cultured plants with naphthaleneacetic acid and thidiazuron. Ethanolic extract of P. sacharosa leaves was obtained, and compounds were separated by open column chromatography and its fractions, as well as callus extracts, were analyzed by Thin Layer Chromatography to identify compounds groups. On the other hand, CD1 and C57BL/6JN mice were administered with fraction 10, and its presence in brain slices was analyzed by fluorescence microscopy; while sections of mice with LPS or F10+LPS, were subjected to in situ hybridization to detect cFos mRNA, marker of neural activity, and CD14, LPS receptor. Finally, Wistar rats with LPS or F10+LPS underwent electroencephalography of the hippocampus activity. As result, a callus culture was established, and chromatographic analysis revealed flavonoids, terpenes, and sterols. In mice, F10 crossed the blood-brain barrier and reduced cFos and CD14 expression in hypothalamus at 3 h. In addition, the electrical activity of hippocampus in rats with LPS showed decreased in theta waves, although with F10 this activity, related to movement and relaxation, was maintained. These findings suggest that P. sacharosa compounds decrease signs of inflammation, allowing the early return of ambulatory activity of animal even with active disease.
Keywords: neuroinflammation, callous tissue, phytochemistry, electroencephalography, cFos, CD14.
