Identificación de posible mecanismo molecular de captación de Acetilcolina en trofozoítos de Entamoeba histolytica

Abstract

Resumen Entamoeba histolytica (E. histolytica) es un protozoario causante de amebiasis intestinal en al menos 500 millones de personas al año, aunque solo el 10% de los infectados presenta síntomas graves. Se conoce que E. histolytica capta moléculas liberadas durante la respuesta inmune del hospedero a través de receptores de membrana que favorecen sus mecanismos patogénicos para el establecimiento de la invasión amebiana. Se ha descrito que E. histolytica interactua con la Acetil colina (ACh) e incrementa factores de virulencia. El objetivo de este estudio fue identificar un receptor de membrana en trofozoítos de E. histolytica para ACh. Los métodos incluyen colocalización para el receptor de ACh y lectina Gal/GalNAc por inmunofluorescencia, análisis bioinformáticos, y cuantificación de la expresión relativa de GTPasas Ras y Rab por qRT- PCR. Los resultados muestran que la lectina Gal/GalNAc subunidad intermedia de 150 kDa funciona como receptor para ACh y a su vez, esta interacción activa GTPasas, Ras y Rab en el citoplasma y están involucradas en el reacomodo del citoesqueleto y tráfico vesicular amebiano.

Abstract Entamoeba histolytica (E. histolytica) is a protozoan that causes intestinal amebiasis in at least 500 million people per year, although only 10% of those infected show severe symptoms. It is known that E. histolytica captures molecules released during the host immune response through membrane receptors that favor its pathogenetic mechanisms for the establishment of amebic invasion. It has been described that E. histolytica interacts with acetylcholine (ACh) and increases virulence factors. The objective of this study was to identify a membrane receptor on E. histolytica trophozoites for acetylcholine. Methods included colocalization for the acetylcholine receptor and Gal/GalNAc lectin by immunofluorescence, bioinformatic analysis, and quantification of the relative expression of Ras and Rab GTPases by qPCR. The results show that the Gal/GalNAc lectin 150 kDa intermediate subunit functions as a receptor for acetylcholine and in turn, this interaction activates GTPases, Ras and Rab in the cytoplasm and are involved in the rearrangement of the cytoskeleton and amoebic vesicular trafficking.