Implicación de los receptores purinérgicos p2x3 en el dolor crónico visceral durante la colitis ulcerativa

Abstract

RESUMEN Implicación de los receptores purinérgicos P2X3 en el dolor crónico visceral durante la colitis ulcerativa Estudios previos han demostrado que la colitis aguda conduce a un aumento en la excitabilidad neuronal de los ganglios de la raíz dorsal (DRG). Sin embargo, los elementos de señalización implicados en esta hiperexcitabilidad aún no se han descifrado por completo. La adenosina 5'-trifosfato (ATP) extracelular es una molécula de señalización sensorial reconocida que aumenta la respuesta nociceptiva después de la inflamación a través de la activación de los receptores P2X3, que se expresan principalmente en las neuronas sensoriales periféricas. El objetivo de este trabajo fue determinar la participación de los receptores P2X3 en la hiperexcitabilidad neuronal en un modelo animal de colitis aguda. Para lograr esto, se administró DNBS (ácido sulfónico de dinitrobenceno; 200 mg/kg) por vía intrarectal a ratones C57BL/6 y se evaluó la gravedad de la inflamación de acuerdo con los siguientes parámetros: pérdida de peso, puntajes macroscópicos y microscópicos. Se utilizó la técnica de patch-clamp para evaluar la excitabilidad neuronal mediante la medición de los cambios en la reobase y la activación del potencial de acción en las neuronas T8-L1 DRG. A-317491, es un antagonista del receptor P2X3 potente y selectivo bien establecido, sirvió para determinar la contribución de este receptor en las respuestas registradas. La expresión proteica de los receptores P2X3 en DRG se evaluó mediante Western blot e inmunofluorescencia. Cuatro días después de la administración de DNBS, se recolectaron secciones de colon para los análisis histológicos, las secciones provenientes de ratones DNBS mostraron ulceraciones focales, perdida de las criptas e infiltración de células inmunes. Las neuronas DRG de ratones tratados con DNBS fueron significativamente más excitables en comparación con los controles; estos cambios se correlacionaron con una mayor expresión del receptor P2X3. Además, la expresión de ARNm de TNF-α también fue significativamente mayor en los tejidos colónicos inflamados en comparación con los controles. La incubación de neuronas DRG con TNF-α dio como resultado una hiperexcitabilidad celular similar a la medida en neuronas provenientes de ratones DNBS. El antagonista selectivo del receptor P2X3, A-317491, bloqueó el efecto inducido por TNF-α. Estos resultados respaldan la hipótesis de que el TNF-α aumenta la excitabilidad de las neuronas DRG que inervan el colon a través de la modulación de la actividad del receptor P2X3.