Efecto protector de la curcumina en línea celular HepG2 ante la posible citotoxicidad de doxazosina, carvedilol y tamsulosina, estudio in vitro

Abstract

RESUMEN EN ESPAÑOL Los 𝛼��/β adrenobloqueadores (doxazosina y carvedilol) se probaron como un tratamiento alternativo para lesiones hepáticas crónicas como fibrosis y/o cirrosis y para una posible regeneración de la cirrosis hepática en un modelo de hámster. Sin embargo, se observó que la doxazosina causó ligeros cambios morfológicos en los hepatocitos, mientras que la curcumina mostró protección al parénquima hepático. Sin embargo, se desconocen los efectos farmacocinéticos de estos 𝛼��/β adrenobloqueadores en la viabilidad celular de los hepatocitos restantes, posiblemente involucrados en la repoblación del parénquima hepático durante la reversión de la cirrosis. El presente estudio fue diseñado para dilucidar en la línea celular HepG2 el efecto protector de la curcumina sobre los posibles efectos secundarios de la doxazosina tamsulosina y el carvedilol ya probados con actividad antifibrótica. La prueba de viabilidad (MTT) confirmó que la doxazosina disminuye la viabilidad celular en función del tiempo y la dosis, el carvedilol y la tamsulosina aumentan la proliferación celular, sin embargo, la curcumina regula estos mecanismos en la línea celular HepG2, aumentando o manteniendo la viabilidad en comparación con el control. El microscopio electrónico de barrido y la tinción con hematoxilina y eosina proporcionaron evidencia de que la doxazosina, el carvedilol y la tamsulosina inducen cambios morfológicos dependientes del tiempo y la dosis en la línea celular HepG2, aproximadamente el 80% de las células están balonizadas y la curcumina protege estos efectos secundarios manteniendo la morfología en el 90% de Las células tratadas. La curcumina disminuye los cambios morfológicos y regula la viabilidad celular en las células tratadas con doxazosina, tamsulosina y carvedilol. Por otra parte, posiblemente los 𝛼��/β adrenobloqueadores produzcan daño celular (dirigido a apoptosis) debido al estrés oxidativo y la curcumina activa mecanismos antioxidantes reduciendo la muerte celular, de esta manera se evalúo BCL-2 y se realizó el ensayo con naranja de acridina, observando coincidencia en la disminución de la expresión de BCL-2 con los cambios morfológicos en las células hepáticos mostrados por la Doxazosina.

RESUMEN EN INGLÉS The 𝛼�/𝛽� adrenoblockers (doxazosin and carvedilol) were tested as an alternative treatment for chronic liver injury such as fibrosis and/or cirrhosis and for possible regeneration of the liver cirrhosis in a model of hamster. However, it was observed that doxazosin caused slight morphological changes in hepatocytes, while that curcumin showed protection to the hepatic parenchyma. Regardless, the pharmacokinetic effects of these 𝛼�/𝛽� adrenoblockers on the cell viability of the remaining hepatocytes, possibly involved in the repopulation of the hepatic parenchyma during cirrhosis reversal, are unknown. The present study was designed to elucidate in the HepG2 cell line the protective effect of curcumin on the possible side effects of doxazosin tamsulosin and carvedilol already tested with antifibrotic activity. The viability test (MTT) confirmed that doxazosin decreases the cell viability dependently time and dose, carvedilol and tamsulosin increases cell proliferation, however, curcumin regulates these mechanisms in HepG2 cell line, increasing or maintaining viability compared to control. Scanning electron microscope and hematoxylin and eosin staining provided evidence that doxazosin, carvedilol and tamsulosin induces morphological changes dependently of time and dose in HepG2 cell line, approximately 80% of the cells are balonized and curcumin protect this side effects maintaining the morphology in 90% of the treated cells. Curcumin decreases morphological changes and regulates cell viability in treated cells with doxazosin, tamsulosin and carvedilol. On the other hand, possibly 𝛼� / β adrenoblockers produce cell damage (directed to apoptosis) due to oxidative stress and curcumin activates antioxidant mechanisms reducing cell death, in this way BCL-2 was evaluated and the test with acridine orange was carried out, observing coincidence in the decrease of the expression of BCL-2 with the morphological changes in liver cells shown by Doxazosin.