RESUMEN
Desarrollo de un sistema para la multiplicación de Agave shawii a partir de cultivo in vitro.
Para la micropropagación de plantas de las subespecies de A. shawii, se utilizaron explantes provenientes de plántulas germinadas in vitro y conservadas en condiciones axénicas. El estudio se dividió en dos experimentos, primero se evaluó la proliferación de brotes in vitro sobre explantes de meristemos de tallo inoculados en tres diferentes dosis de bencilaminopurina (BA) 1.0 mg L-1 en A. shawii shawii y 2.0 y 3.0 mg L-1 de BA en A. shawii goldmaniana, durante 80 días. En el segundo experimento se evaluaron las respuestas morfogénicas de diferentes tipos de explantes (hoja, tallo y raíz) provenientes de A. shawii goldmaniana, que fueron inoculados en medios de cultivo que contenían diferentes concentraciones de citocinina más auxina en mg L- 1 (BA y 2,4-D) respectivamente (0 + 0), (3.0 + 0), (0 + 3.0), (2.0 + 2.0), (0 + 1.0). En la etapa de aclimatación las plántulas propagadas fueron trasplantadas en dos grupos, el primero de estos eran plántulas sembradas de manera individual y las segundas fueron sembrados en conjuntos de brotes sin separar, ambos grupos fueron sembrados en un sustrato de perlita más turba 1:1 y conservadas en invernadero a 26º C, aquí se evaluó el porcentaje de sobrevivencia según el grupo o las condiciones de siembra.
Para los resultados del primer experimento se hizo un análisis estadístico con la prueba de Kruskal-Wallis confirmando la significancia del tratamiento 2 (2.0 mg L-1 de BA) en la producción de brotes múltiples respecto al resto de tratamientos. En el segundo experimento se evaluaron los resultados de manera cuantitativa, tomando en cuenta la magnitud de respuesta morfogénica respecto al testigo, resultando que el explante proveniente del meristemo del tallo era el mejor para la formación de brotes y se relacionaba positivamente con la sinergia de los RCV (BA y 2,4-D) en cantidades equilibradas; los explantes tomados de tejido de hoja y raíz solo presentaron formación de tejido calloso y no resultaron aptos para la organogénesis directa, mientras que los explantes provenientes de tejido meristemático de tallo tuvieron cambios morfogénicos en todas las concentraciones incluyendo brotación múltiple. El porcentaje de sobrevivencia de plántulas sembradas individualmente fue de 70% y el de plantas sembradas en conjunto de brotes fue de 65% por la probable condición de falta de desarrollo total del sistema radicular.
ABSTRACT
System development for Agave shawii multiplication from in vitro culture
For the micropropagation of plants from the A. shawii subspecies, in vitro explants from germinated seedlings whose were preserved under axenic conditions were used. The study was divided into two experiments, first the in vitro buds proliferation was evaluated on stem explants from inoculated meristems in three different doses of benzylaminopurine (BA) 1.0 mg L-1 in A. shawii shawii and 2.0 and 3.0 mg L- 1 BA in A. shawii goldmaniana, for 80 days. In the second experiment, an evaluation was also made, this time about the morphogenic responses from different explants types (leaf, stem and root) from A. shawii goldmaniana, which were inoculated in culture medium containing different concentrations of cytokinin plus auxin (BA and 2,4-D mg L- 1) respectively (0 + 0), (3.0 + 0), (0 + 3.0), (2.0 + 2.0), (0 + 1.0). In the acclimatization stage, the propagated seedlings were transplanted into two groups, in the first one, the seedlings were planted individually and for the second they were planted in buds sets; both groups were planted in perlite substrate plus 1: 1 peat and were preserved in a greenhouse at 26º C, where the survival percentage was evaluated according to the group or the sowing conditions.
Concerning the results of the first experiment, a statistical analysis was made with the Kruskal-Wallis test, confirming the significance of treatment 2 (2.0 mg L-1 of BA) in the production of multiple buds compared to the rest of the treatments. In the second experiment, the results were evaluated quantitatively, taking into account the magnitude of the morphogenic response as to the control, resulting that the explant from the stem meristem was the best for the bud formation and was positively related to the synergy of the RCV (BA and 2,4-D) in balanced amounts; the explants taken from leaf and root tissue only presented callus tissue formation and were not suitable for direct organogenesis, while explants from stem meristematic tissue had morphogenic changes at all concentrations including multiple sprouting. The survival percentage of seedlings planted individually was 70% and those that were planted in sets was 65% due to the probable lack condition of the total root system development.
