Estudio del efecto del acetato de leuprolida sobre la composición corporal en ratas hembra wistar

Abstract

Resumen: El acetato de leuprolida es un agonista de la GnRH con efecto directo en la secreción de LH y FSH, capaz de generar aumentos de peso, sin embargo, no hay experimentos bien conducidos que estudien cambios en la composición corporal y los mecanismos de acción implícitos. La grelina y leptina son moléculas reguladoras del proceso hambre-saciedad, mientras que, la liporoteinlipasa (LPL) es una enzima responsable del almacenamiento de ácidos grasos en adipocitos y células musculares. Posiblemente el acetato de leuprolida pueda afectar la expresión del RNAm de esos componentes. El objetivo del trabajo fue evaluar cambios en composición corporal, tasa metabólica y expresión del RNAm para grelina, leptina y LPL bajo un tratamiento a largo plazo con acetato de leuprolida en ratas Wistar hembra. Se formaron 4 grupos de ratas Wistar hembra de 146.8 g ± 3.8 g con un grupo íntegro (AL) y uno ovariectomizado (OVX+AL), ambos tratados con 5 μg/Kg de peso de acetato de leuprolida cada 72 h por 120 días. De igual forma dos grupos similares que los anteriores (CTRL y OVX) pero sólo con la aplicación del vehículo (0.9 % NaCl). Cada 20 días se analizó la composición corporal, análisis de carcasa, grasa bajo la piel, consumo de oxígeno y producción de CO2 para conocer la tasa metabólica y adicionalmente un ensayo de PCR para medir expresión de RNAm de grelina, leptina y LPL. El grupo OVX resulto con un 51 % de incremento en peso mientras que el grupo AL con 47 %, los grupos OVX+AL y CTRL 38 y 33% respectivamente comparado con el inicio. La masa grasa resultó un 14 % por encima para AL vs CTRL 19 % para OVX vs OVX+AL, la masa libre de grasa resultó mayor en AL comparado con CTRL en tanto que, OVX y OVX+AL compartieron resultados muy similares. Al final del experimento la expresión de grelina resulto un 75 % más alta en el grupo AL que OVX+AL mientras que el grupo CTRL resultó con un 25 % menos comparado con OVX. La expresión del RNAm de LPL resultó en un 48 % más alta para el grupo AL comparado con OVX+AL. Interesantemente El grupo CTRL tuvo una expresión 51 % más baja comparado con el grupo OVX. No se presentaron diferencias importantes en el ensayo para leptina. El acetato de leuprolida puede modificar el peso, la composición corporal, la tasa metabólica y generar cambios importantes en la expresión del RNAm de LPL, y grelina, lo cual significa que posibles mecanismos orexigénicos y de señalización de almacenaje de ácidos grasos estén involucrados. Además, los resultados indican un efecto directo del acetato de leuprolida no importando la presencia o ausencia de hormonas gonadales sobre el peso y la composición corporal.

Abstract: Leuprolide acetate a GnRH agonist has direct effect on LH and FSH secretion and causes changes in body weight in experimental and clinical trials; however, there are no studies properly directed on body composition analysis and possible mechanisms implied. Ghrelin, an orexigenic peptide and leptin are associated to modulate hunger-satiety process, while lipoproteinlipase (LPL) an enzyme that can facilitate fatty acid storage in muscle and adipose tissues. Possibly mRNA expression of that components could be modified by leuprolide acetate action. The aim of this work was to evaluate changes in body composition, metabolic rate and mRNA expression of ghrelin, leptin and lipoproteinlipase under a long-term leuprolide acetate experiment in female Wistar rats. Female Wistar rats (146.8 g ± 3.8) were used, forming the following groups: a nonovariectomized group (LA) and ovariectomized group (OVX+LA) both treated with a leuprolide acetate dose every 72 hours for 120 days (5 μg/Kg). Likewise, another nonovariectomized (CTRL) and one ovariectomized (OVX) groups were formed, which received only an equivalent volume of vehicle (0.9% NaCl). Every 20 days body composition was assessed, carcass analysis and chemical analysis of fat mass under skin, oxygen uptake and CO2 production to measure metabolic rate and additionally RT-PCR was performed to measure mRNA expression of ghrelin, leptin and LPL. OVX group had an increase in weight by 51% while the LA group by 47%, OVX+LA and CTRL 38% and 33%, respectively compared to baseline. The analysis of fat mass (FM) was 14% higher for LA vs CTRL and 19% higher for OVX vs OVX+LA, fat-free mass (FFM) was higher in the LA group compared to CTRL while OVX and OVX+LA showed a pattern very similar for both components. At the end of the experiment the mRNA expression of ghrelin in the AL group was 75% higher than OVX+LA while CTRL group had an expression of 25% lower compared to OVX. The LPL mRNA expression was 48% higher for LA compared to OVX+LA group. Interestingly CTRL group had an expression of 51% lower compared to the OVX group. It wasn´t differences in leptin mRNA assay. Leuprolide acetate can modify weigh; body composition, metabolic rates and generates significant changes in mRNA expression of LPL and ghrelin, which means that mechanisms of orexigenic signaling and fatty acid storage maybe are implied. In addition, the results indicate a direct effect of LA regardless of the presence or absence of gonadal hormones on body weight and composition