Papel de la doxazosina y el carvedilol en la regeneración celular en un modelo de reversión de cirrosis hepática en hamster

Abstract

La cirrosis hepática es el resultado final del daño crónico al hígado a causa del abuso en el proceso de detoxificación que se lleva a cabo naturalmente en este órgano provocando su deterioro y desencadenando una serie fenómenos orquestados principalmente por la sobre síntesis de matriz extracelular y sintomatologías como ascitis, varices esofágicas, fibrosis porto portal (cirrosis) y con mayor incidencia hipertensión portal. En condiciones normales este órgano llega a contrarrestar el daño, disminuyendo las fibras de colágena con ayuda de metaloproteasas (MMPs), en un hígado cirrótico las células madre (células ovales) juegan un papel importante en regeneración del órgano, estas células son activadas por factores como el FGH principalmente y proliferan llenando espacios vacíos formando nódulos de regeneración. Se ha demostrado que el nervio vago tiene una participación en la activación en estas células progenitoras, las cuales también pueden ser activadas cuando el hígado se somete a una hepatectomía parcial regenerándose un 70% de su estructura. Actualmente la cirrosis es catalogada como la quinta causa de muerte en México, su tratamiento actual consta únicamente de la eliminación del agente causal y el trasplante hepático. En el presente trabajo se evaluó el uso de fármacos α y β bloqueadores con el propósito de analizar su participación en el proceso de regeneración del tejido hepático, la inhibición de las células estelares hepáticas y disminución de los efectos antihipertensivos juegan un papel favorable en la repoblación celular ya que dan tiempo a que células de regeneración (células ovales) y células en estado quiescente formen nódulos regenerativos en el parénquima hepático. El trabajo constó del análisis de 70 hámsteres (Mesocricetus auratus) macho en una etapa avanzada de cirrosis hepática previamente establecida con inyecciones intraperitoneales de CCl4 usando petrolato como vehículo. Se 16 analizaron parámetros importantes en la funcionalidad hepática como: 1) funcionalidad hepática mediante las transaminasas, albúmina, y algunos factores de coagulación, 2) análisis histológico con tinciones especiales para fibras de colágeno (tinción rojo-sirio), síntesis de glucógeno (tinción de PAS), estructura del parénquima hepático (tinción HE), 3) inmunohistoquímica de marcadores específicos de regeneración (CD 90, Ki67), 4) análisis molecular con la determinación de marcadores (AFP, Cmyc, CKT-7, CKT-18, FGH) de las muestras de hígado extraídas. El análisis bioquímico demuestra una mejora en la funcionalidad de los hígados tratados con Carvedilol y Doxasocina esto con la disminución en la concentración de las transaminasas en suero, por otro lado en el análisis morfológico de las tinciones los hígados en tratamiento recuperan la estructura típica de un hígado sano y en mayor grado los hígados con ambos tratamientos, esto al igual que en el análisis molecular con los marcadores de regeneración donde los dos tratamientos presentan un aumento en la expresión de estos marcadores, y la disminución de oncogenes descartando la proliferación descontrolada a cargo de las células ovales también vistas en la inmunohistoquímica rodeando la zona porta. En base a lo anterior el tratamiento Carvedilol en comparación con la Doxazosina, y aun mejor la aplicación de estos dos tratamientos juntos arrojan una mejora progresiva y acentuada, observándose una mejora equiparable con el grupo control tanto histológica, bioquímica y molecularmente, incluso superando la aplicación del tratamiento aislado lo que nos lleva al uso terapéutico de estos fármacos como una posible medida alternativa para el tratamiento en pacientes con cirrosis.

Cirrhosis of the liver is the result of the chronic damage to the liver caused by the abuse in the process of detoxification that takes place naturally in this organ. Provoking its deterioration and triggering a series of phenomena. Principally due to the over synthesis of the extracellular matrix. And symptomatology’s such ascites, esophageal varices, portal fibrosis “cirrhosis” and with higher incidence of portal hypertension. In normal conditions this organ can counter the damage by decreasing the collagen fibers with the help of metalloproteinases. (MMPs), In a cirrhotic liver stem cells play an important role in regenerating the organ. These cells are activated by factors such as the FGH principally, proliferate by filling empty spaces forming regenerating nodules. It has been shown that the Vagus nerve has a participation in the activation in the progenitor cells. That which can also be activated when the liver undergoes partial hepatectomy and regenerates 70% of its structure. Currently the cirrhosis is classified as the fifth leading death in Mexico. Its current treatment consists only of elimination of the causative agent and liver transplant. In the present study, we evaluated the use of A- and B- blockers to analyze their participation in the regeneration process of the hepatic tissue, inhibition of the hepatic stellar cells and decrease of the antihypertensive effects play a favorable role in repopulation because they give time for the regenerative cells (oval cells) and cells in the quiescent state to form regenerative nodules in the liver parenchyma. The study consisted of the analysis of 70 hamsters (Mesocricetus Auratus) male at an advanced stage of liver cirrhosis previously established with intraperitoneal injections of CCI4 using petrolatum as a form of vehicle. Important parameters in the liver function were analyzed: 1) hepatic function 18 through transaminases, albumin, and coagulation factors; 2) histological analysis with special stains for collagen fibers (red-Syrian staining), glycogen synthesis PAS), hepatic parenchyma structure (HE staining), 3) Immunohistochemistry of specific regeneration markers (CD 90, Ki67,), 4) molecular analysis with the determination of markers (AFP, C-myc, CKT-7, CKT-18, FGH) from liver samples extracted. The biochemical analysis demonstrates an improvement in the functionality of livers treated with Carvedilol and Doxazocin this with the decrease in serum transaminases concentration, on the other hand in the morphological analysis of the stains the livers in treatment recover the typical structure of a healthy liver to a greater degree. livers with both treatments, as well as in the molecular analysis with the regeneration markers where the two treatments present an increase in the expression of these markers, and the decrease of oncogenes discarding the uncontrolled proliferation in charge of the oval cells also seen in the immunohistochemistry surrounding the portal zone. Based on the above, the treatment Carvedilol in comparison with Doxazocin, and even better the application of these two treatments together show a progressive and accentuated improvement. Observing a comparable improvement with the control group both histologically, biochemically, and molecularly. Even surpassing the application of the isolated treatment which leads us to the therapeutic use of these drugs as a possible alternative measure for treatment in patients with cirrhosis.